Química

Precipitación de proteínas


Precipitación isoeléctrica

Las proteínas portan numerosos grupos ionizables con diferentes pagKaValores. Cada proteína tiene una específicapH-Valor en el que las cargas positivas y negativas de la proteína se equilibran exactamente entre sí. La proteína en este punto no tiene carga neta y ya no se movería en un campo eléctrico. Esta pHEl valor se conoce como punto isoeléctrico (IEP o pI).

La solubilidad de una proteína se hace muy fuerte por la pH-Valor del medio ambiente y es más bajo en el punto isoeléctrico.

Por encima o por debajo del IEP, todas las moléculas tienen la misma carga (positiva o negativa) y por lo tanto se repelen entre sí, evitando así la aglomeración en agregados insolubles y la proteína permanece en solución. Por ejemplo, la solubilidad de la lactoalbúmina es pH 5.2-5.3 mínimo, por encima o por debajo de este pHEl valor aumenta drásticamente la solubilidad de la proteína. Este comportamiento es típico de las proteínas globulares, con el pH-Valor al que se produce la mínima solubilidad cambia de proteína a proteína.

Tab.1
Puntos isoeléctricos de algunas proteínas
proteínaIEP
pepsina1,0
Albúmina de suero4,8
Ureasa5.,0
Collages6,7
Mioglobina7,0
Hemoglobina (humana)7,07
Ribonucleasa9,6
Citocromo c10,6
Lisozima11,8

Ahora, dado que diferentes proteínas tienen diferentes valores de IEP, se pueden separar unas de otras mediante precipitación isoeléctrica. En su IEP, una proteína precipita más o menos completamente, mientras que las otras proteínas permanecen en solución a este valor de pH. En la práctica, este efecto a menudo se combina con la sal de la proteína. Las proteínas que han precipitado en su conformación nativa se pueden volver a disolver en un medio con una concentración de sal adecuada y un pH apropiado.


Video: Precipitación de Proteínas por Salado (Enero 2022).